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人类基因组计划二期五年目标的焦点:DNA测序
作者:房海燕 夏家辉  来源:国外医学(遗传学分册) 年份:2000 期刊类型 :期刊 关键词: DNA测序  人类基因组计划 
描述:在人类基因组计划八年的发展历程中 ,做为重点项目的DNA测序取得了辉煌的成就。测序技术在不断的推陈出新 ,使大规模测序能力以每年几十个Mb级速度递增。 1998年 ,NIH及DOE公布了HGP二期五年目标 ,提出了提前于 2 0 0 3年完成全基因组测序的重大计划。
DNA循环测序中一些常见影响因素的研究
作者:何云贵 房海燕 夏昆 夏家辉  来源:中华医学遗传学杂志 年份:2000 期刊类型 :期刊 关键词: 循环测序  DNA  因素 
描述:目的 研究 DNA循环测序中一些常见因素的影响。方法 对循环测序中模板、引物、测序反应条件及其产物的纯化等常见因素进行了比较研究。结果 测序模板浓度过低 ,则核苷酸曲线的信∶噪比小 ,甚至不出现荧光信号。模板浓度过高 ,判读的核苷酸长度降低 ;引物的长度、G+C含量及 Tm值对测序结果无明显影响 ;
用改进的重叠区扩增基因拼接法构建中间缺失突变体
作者:李成华 房海燕 邓小云 夏昆 郑多 夏家辉  来源:中华医学遗传学杂志 年份:2004 期刊类型 :期刊 关键词: 克隆  重叠区扩增基因拼接法  中间缺失突变体 
描述:目的构建缺失第325~373位氨基酸密码子的磷脂酸磷酸化激酶β(phosphatidylinositol 4-kinase beta,PI4K-β)基因,以探索一种简便的构建中间缺失突变体的方法. 方法应用重叠区扩增基因拼接法的原理,在拼接延伸后,再进行一次PCR扩增,得到缺失第325~373位氨基
酵母双杂交技术分析耳聋基因功能的实验研究
作者:肖自安 谢鼎华 房海燕 黄亮群 施小六 夏家辉  来源:听力学及言语疾病杂志 年份:2004 期刊类型 :期刊 关键词: 克隆  酵母双杂交技术  耳聋基因 
描述:目的在耳聋基因功能的蛋白质相互作用研究领域建立酵母双杂交实验技术,探讨第三代酵母双杂交系统在该领域的应用价值.方法利用第三代MATCHMAKER GAL4酵母双杂交系统,以最常见的耳聋基因GJB2(Cx26)为诱饵,以人胎脑cDNA文库为猎物,钓取Cx26的相互作用蛋白质的阳性克隆,DNA测序阳性克
P11融合蛋白表达、纯化及抗血清的制备
作者:谭志平 黄亮群 郑多 房海燕 夏昆 夏家辉  来源:湖南医科大学学报 年份:2002 期刊类型 :期刊 关键词: p11(CalpactinI  lightchain)  亲和层析  融合蛋白  GST  抗血清 
描述:目的 :表达GST p11和 6xHis p11融合蛋白并制备GST p11特异性抗体。方法 :将人p11基因克隆入两种原核表达载体pGEX 4T 2和pQE30 ,分别在大肠杆菌BL2 1和M15中表达 ,用GlutathioneSepharose 4B和Ni NTAagar ose亲和柱分别纯化
Cx31相互作用蛋白:p11在酵母中表达可能存在翻译移码
作者:黄亮群 施小六 谭志平 房海燕 郑多 夏家辉 夏昆  来源:生物化学与生物物理学报 年份:2002 期刊类型 :期刊 关键词: 依钙结合蛋白I  轻链  体外结合  移码  间隙连接蛋白31  酵母双杂交 
描述:間隙連接蛋白31(connexin31, Cx31)是間隙連接蛋白(connexin)家族中的一員,關于Cx31的功能及其調節知之甚少。Cx31胞內羧基端包含幾個可能的磷酸化位點。爲對其功能有所瞭解,利用酵母雙雜交技術,篩選與Cx31梭基端(206~270位密碼子之間)相互作用的蛋白質,分離到了p1