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PCR技术在快速筛选DNA文库中的应用
作者:赵永祥 刘斌 张昊宇 胡冬煦 杨进福 夏家辉 潘乾 薛志刚  来源:中国医学工程杂志 年份:2004 期刊类型 :期刊 关键词: 文库  DNA  PCR 
描述:目的探讨运用PCR(polymerase chain reaction)方法快速筛选DNA文库的可行性.方法以猪α-1,3GT cDNA片段为探针,用cDNA上的特异性序列合成的引物,采用噬菌斑原位杂交和PCR相结合的方法,对猪的gDNA文库进行α-1,3GT基因筛选,经酶切、Southern Bl
中国人基因组YAC文库的构建及其应用初探
作者:匡达人 夏家辉 杨智勇 孙黎 何小轩 罗文生 黎伶俐 戴和平 杨毅 朱亚辉 杜娟 龙志高 谭跃球 傅俊江 潘乾 李麓芸  来源:高技术通讯 年份:1993 期刊类型 :期刊 关键词: 中国人基因组YAC文库  染色体区带YAC文库 
描述:用pYAC4作为载体,对构建中国人基因组YAC文库进行了研究,获得了初步数据,得到了1000多个YAC克隆子,对其中380个克隆子进行分析,确认了其来源为中国人基因组DNA,随机取样分析结果表明,其插入片段的大小在200—700kb之间。结合应用染色体显微切割、PCR技术所建的11q23-qter区
中国人基因组 YAC 文库的构建及首批克隆鉴定
作者:黎伶俐 夏家辉 潘乾 廖晓东 龙志高 李麓芸 邓汉湘 杨智勇 匡达人  来源:当代医师杂志 年份:1996 期刊类型 :期刊 关键词: 中国人基因组YAC文库  克隆鉴定 
描述:本文采用PJS97/PJS98及TPH 274载体主宿系统构建中国汉族男性基因组YAC文库,在初探基础上不断改进方法,通过控制脉冲条件的原位筛选去除小片段DNA分子,用多胺溶液防止68℃对大片
基因组YAC文库构建方法的几点改进
作者:杨智勇 匡达人 黎伶俐 陆劭 宋明浩 戴和平 龙志高 潘乾 李麓芸 夏家辉  来源:生物化学与生物物理进展 年份:1996 期刊类型 :期刊 关键词: YAC文库构建  酵母人工染色体  原位电泳筛除 
描述:以pJS97、pJS98为载体,对中国人基因组YAC文库的构建进行了尝试建立了一种对小片段DNA“原位电泳筛除”的方案,采用多胺溶液处理以减少大片段DNA的降解,使整个建库工作更加简便、有效.此外,改进了转化子的挑取和保存的方法,既简化了操作,又减少了杂菌污染和交叉污染.这些改进的方案,可以推广到其
荧光原位杂交法定位人类染色体8q24.1单拷贝探针
作者:阮庆国 邓汉湘 潘乾 黄蕾 廖晓东 夏家辉  来源:自然科学进展 年份:1996 期刊类型 :期刊 关键词: 基因组DNA文库  单拷贝探针  荧光原位杂交  区带特异性遗传标记 
描述:运用基因组DNA文库筛选法和荧光原位杂交法成功地定位了来自人类染色体8q24.1显微切割文库中的两个单拷贝探针,结果证明这两个探针确实来自于所切割区域,从而为进行遗传病的RFLP分析和人类基因组分析提供了有意义的遗传标记。
小鼠 Connexin31基因组克隆的筛选及荧光原位杂交定位
作者:李文正 薛志刚 王果 潘乾 戴和平 夏家辉  来源:湖南医科大学学报 年份:2001 期刊类型 :期刊 关键词: 染色体  荧光  原位杂交  小鼠  基因 
描述:Connexin 31 (Cx31 )是人类遗传性疾病基因 ,利用小鼠Cx31基因的cDNA序列探针从小鼠的基因组文库筛选出Cx31的gDNA克隆 ,并用荧光原位杂交技术将其定位于小鼠 4号染色体的中部 ,为小鼠Cx31的基因结构和功能的研究以及转基因小鼠和基因剔除小鼠的研究打下了良好的基础
人类基因组计划二期五年目标的焦点:DNA测序
作者:房海燕 夏家辉  来源:国外医学(遗传学分册) 年份:2000 期刊类型 :期刊 关键词: DNA测序  人类基因组计划 
描述:在人类基因组计划八年的发展历程中 ,做为重点项目的DNA测序取得了辉煌的成就。测序技术在不断的推陈出新 ,使大规模测序能力以每年几十个Mb级速度递增。 1998年 ,NIH及DOE公布了HGP二期五年目标 ,提出了提前于 2 0 0 3年完成全基因组测序的重大计划。
人Endostatin cDNA的克隆及其在HT1080细胞中的表达
作者:卿志荣 唐爱发 蒋冬贵 郑多 夏昆 李宜雄 陈主初 夏家辉  来源:湖南医科大学学报 年份:2002 期刊类型 :期刊 关键词: HT1080细胞  血管形成抑制因子  Endostatin 
描述:目的 :构建能表达人Endostatin的真核表达质粒。方法 :设计引物从成人肝cDNA文库中通过PCR扩增到EndostatincDNA ,并在 5′端融合编码人胰岛素信号肽序列 ,经测序证实后
与Atrophin-1同源的人类新基因的克隆和定位
作者:夏家辉 刘春宇 王德安 阮庆国 崔峰 谢微 潘乾 廖晓东 戴和平 邓汉湘  来源:自然科学进展 年份:1999 期刊类型 :期刊 关键词: 生物降解原油  GC  IRMS  辽河油田西部凹陷 
描述:将齿状核红核苍白球路易氏体退行性病变(DRPLA)致病基因(Atrophin-1)cDNA序列对EST数据库进行同源性比较,得到与(Atrophin-1显著相似的EST 25个,依EST间的相互关系构建5个EST重叠群。根据其中的3个EST重叠群设计引物,对cDNA文库扩增,PCR法制备探针,筛选人
人Oligophrenin 1样(OPHN1L)基因的克隆
作者:夏家辉 汤熙翔 唐冬生 崔峰 禹宽平 潘乾 戴和平 廖晓东 龙志高  来源:自然科学进展 年份:2000 期刊类型 :期刊 关键词: OPHN1  同源性分析  OPHN1L  基因克隆 
描述:将人Oligophrenin 1(OPHN1)基因编码区2406 bp与EST数据库进行同源性分析,得到一个363 bp的EST AA035622与OPHN1基因编码区一致性为62%,该EST与一个cDNA序列AB014521完全匹配.在ABO14521中设计引物与cDNA文库载体臂上引物行巢式PC