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一种简便快速构建基因突变体的有效方法
作者:张铭湘 文剑 夏昆 郑多 张灼华 夏家辉  来源:中华医学遗传学杂志 年份:2002 期刊类型 :期刊 关键词: 定点诱导突变  基因  聚合酶链反应 
描述:目的 介绍一种简便、快速、准确构建定点诱导突变体的新技术。方法 设计 3条引物 ,一条突变引物 ,另外两条引物位于突变引物的两侧 ,并带上合适的酶切位点 ,以供突变片段构建完成以后可以克隆进入合适载体。然后以突变引物与其附近的反向引物一起扩增带突变位点的片段 ,再以此 PCR产物片段为引物与剩下的另
神经退化性疾病生物能量代谢和氧化应激研究进展
作者:张铭湘 夏家辉  来源:生命科学研究 年份:2000 期刊类型 :期刊 关键词: 电子传递链  氧化磷酸化  氧化损伤  线粒体 
描述:衰老是导致几种常见的神经系统退化性疾病的主要危险因素 ,包括帕金森氏病(Parkinson's disease PD) ,肌萎缩性侧索硬化 (Amyotrophic lateral sclerosis,ALS) ,早老性痴呆 (Alzheimer's disease AD)和亨廷顿氏病 (Hunti
老年痴呆症相关基因Nicastrin的转录调控
作者:杨眉 蔡芳 潘乾 龙志高 夏家辉 夏昆 张灼华  来源:生物化学与生物物理进展 年份:2009 期刊类型 :期刊 关键词: 1  启动子  老年痴呆症  转录调控  Nieastrin  NFAT  AP 
描述:APP蛋白经过降解,形成老年痴呆症患者脑内老年斑的主要成分.由PS(早老素),NCT,PEN-2和APH-1 4种膜蛋白组成的γ分泌酶催化该降解过程.为了了解人类nicastrin(NCT)基因
Transcriptional Regulation of the Alzheimer's Disease-related Gene, Nicastrin
作者:杨眉 蔡芳 潘乾 龙志高 夏家辉 夏昆 张灼华  来源:生物化学与生物物理进展 年份:2009 期刊类型 :期刊 关键词: 1  启动子  老年痴呆症  转录调控  Nicatrin  NFAT  AP 
描述:APP蛋自经过降解,形成老年痴呆症患者脑内老年斑的主要成分。由PS(早老素),NCT,PEN-2和APH-14种膜蛋白组成的γ分泌酶催化该降解过程。为了了解人类nicastrin(NCT)基因的转录调控机制,确定了其在人脑中的转录起始位点以及其编码区上游大小不等片段的转录起始活性。EMSA分析证实N
逆转录病毒载体介导的RNAi技术稳定抑制前列腺癌细胞株β-catenin的表达
作者:胡政 蔡芳 程莉娟 夏昆 夏家辉 张灼华  来源:中南大学学报(医学版) 年份:2005 期刊类型 :期刊 关键词: 前列腺癌  RNAi  catenin  稳定抑制  Wnt/β  逆转录病毒载体 
描述:目的:建立稳定抑制β-catenin基因表达的前列腺癌细胞株,为探讨Wnt/β-catenin信号在前列腺癌发生中的作用提供合适的细胞模型.方法:在β-catenin基因编码区选择3个RNAi作用的靶位点,体外合成前体DNA链,复性后连入逆转录病毒载体pSUPER-retro,转染包装细胞PA317
用酵母双杂交技术筛选与APC相互作用的蛋白及其cDNA克隆
作者:钟向阳 张灼华 施小六 夏昆 禹宽平 夏家辉  来源:云南大学学报(自然科学版) 年份:1999 期刊类型 :期刊 关键词: 医学遗传学  湖南医科大学  神经生物学功能  cDNA克隆  白及  国家重点实验室  酵母双杂交技术  中枢神经系统  蛋白质相互作用  腺瘤息肉病 
描述:用酵母双杂交技术筛选与APC相互作用的蛋白及其cDNA克隆
用改进的重叠区扩增基因拼接法构建中间缺失突变体
作者:李成华 房海燕 邓小云 夏昆 郑多 夏家辉  来源:中华医学遗传学杂志 年份:2004 期刊类型 :期刊 关键词: 克隆  重叠区扩增基因拼接法  中间缺失突变体 
描述:目的构建缺失第325~373位氨基酸密码子的磷脂酸磷酸化激酶β(phosphatidylinositol 4-kinase beta,PI4K-β)基因,以探索一种简便的构建中间缺失突变体的方法. 方法应用重叠区扩增基因拼接法的原理,在拼接延伸后,再进行一次PCR扩增,得到缺失第325~373位氨基
P11融合蛋白表达、纯化及抗血清的制备
作者:谭志平 黄亮群 郑多 房海燕 夏昆 夏家辉  来源:湖南医科大学学报 年份:2002 期刊类型 :期刊 关键词: p11(CalpactinI  lightchain)  亲和层析  融合蛋白  GST  抗血清 
描述:目的 :表达GST p11和 6xHis p11融合蛋白并制备GST p11特异性抗体。方法 :将人p11基因克隆入两种原核表达载体pGEX 4T 2和pQE30 ,分别在大肠杆菌BL2 1和M15中表达 ,用GlutathioneSepharose 4B和Ni NTAagar ose亲和柱分别纯化
Cx31相互作用蛋白:p11在酵母中表达可能存在翻译移码
作者:黄亮群 施小六 谭志平 房海燕 郑多 夏家辉 夏昆  来源:生物化学与生物物理学报 年份:2002 期刊类型 :期刊 关键词: 依钙结合蛋白I  轻链  体外结合  移码  间隙连接蛋白31  酵母双杂交 
描述:間隙連接蛋白31(connexin31, Cx31)是間隙連接蛋白(connexin)家族中的一員,關于Cx31的功能及其調節知之甚少。Cx31胞內羧基端包含幾個可能的磷酸化位點。爲對其功能有所瞭解,利用酵母雙雜交技術,篩選與Cx31梭基端(206~270位密碼子之間)相互作用的蛋白質,分離到了p1
人神经元钾离子通道 α 亚基基因的分子克隆
作者:夏昆 何云贵 郑多 张华莉 潘乾 夏家辉  来源:科学通报 年份:2001 期刊类型 :期刊 关键词: 克隆  突变检测  痉挛性截瘫  人神经元钾离子通道α亚基基因 
描述:为克隆新的钾子通道基因并研究其与疾病的关系,将大鼠的神经元钾离子通道α亚基编码区序列在人的EST数据库进行BLAST分析,得到一个与其有87%的一致性的EST,通过重叠群的构建和5′-RACE反应,克隆了人神经元钾离子通道α亚基(homo sapiens neuronal potassium cha