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人类间隙连接蛋白CX58基因的克隆
作者:陆春叶 张华莉 邓昊 夏昆 潘乾 夏家辉  来源:中华医学遗传学杂志 年份:2002 期刊类型 :期刊 关键词: 同源性分析  聚合酶链反应  间隙连接蛋白  基因克隆 
描述:目的 利用同源性分析 ,克隆定位新的人类间隙连接蛋白基因 ,并探讨该基因和遗传性耳聋的关系。方法 将小鼠 Cx5 7基因的编码区与美国国家生物信息中心 (National Center for BiotechnologyInformation,NCBI)的表达序列标签数据库 (database of
P11融合蛋白表达、纯化及抗血清的制备
作者:谭志平 黄亮群 郑多 房海燕 夏昆 夏家辉  来源:湖南医科大学学报 年份:2002 期刊类型 :期刊 关键词: p11(CalpactinI  lightchain)  亲和层析  融合蛋白  GST  抗血清 
描述:目的 :表达GST p11和 6xHis p11融合蛋白并制备GST p11特异性抗体。方法 :将人p11基因克隆入两种原核表达载体pGEX 4T 2和pQE30 ,分别在大肠杆菌BL2 1和M15中表达 ,用GlutathioneSepharose 4B和Ni NTAagar ose亲和柱分别纯化
细胞裂解法对植入前诊断中聚合酶链反应扩增效率的影响
作者:李崎 马燕琳 潘乾 夏家辉 戴和平 夏昆  来源:湖南医科大学学报 年份:2002 期刊类型 :期刊 关键词: 单细胞  植入前诊断  聚合酶链反应 
描述:目的 :探讨优化细胞裂解条件 ,提高植入前诊断中聚合酶链反应的扩增效率。方法 :吸取单个淋巴细胞或人胚胎单卵裂球 ,用碱裂解液、蛋白酶K裂解液和改良的蛋白酶K裂解液进行处理 ,随后以巢式 -聚合酶链反应扩增人肾上腺脑白质营养不良基因 (ALD基因 )的 3号外显子 ,比较其扩增效率。结果 :三种裂解
Cx31相互作用蛋白:p11在酵母中表达可能存在翻译移码
作者:黄亮群 施小六 谭志平 房海燕 郑多 夏家辉 夏昆  来源:生物化学与生物物理学报 年份:2002 期刊类型 :期刊 关键词: 依钙结合蛋白I  轻链  体外结合  移码  间隙连接蛋白31  酵母双杂交 
描述:間隙連接蛋白31(connexin31, Cx31)是間隙連接蛋白(connexin)家族中的一員,關于Cx31的功能及其調節知之甚少。Cx31胞內羧基端包含幾個可能的磷酸化位點。爲對其功能有所瞭解,利用酵母雙雜交技術,篩選與Cx31梭基端(206~270位密碼子之間)相互作用的蛋白質,分離到了p1
一种简便快速构建基因突变体的有效方法
作者:张铭湘 文剑 夏昆 郑多 张灼华 夏家辉  来源:中华医学遗传学杂志 年份:2002 期刊类型 :期刊 关键词: 定点诱导突变  基因  聚合酶链反应 
描述:目的 介绍一种简便、快速、准确构建定点诱导突变体的新技术。方法 设计 3条引物 ,一条突变引物 ,另外两条引物位于突变引物的两侧 ,并带上合适的酶切位点 ,以供突变片段构建完成以后可以克隆进入合适载体。然后以突变引物与其附近的反向引物一起扩增带突变位点的片段 ,再以此 PCR产物片段为引物与剩下的另
运用单细胞聚合酶链式反应进行植入前诊断的性别鉴定
作者:马燕琳 李崎 潘乾 夏家辉 李艳萍 刘冬娥 戴和平 夏昆  来源:湖南医科大学学报 年份:2002 期刊类型 :期刊 关键词: 多聚酶链反应  单细胞  植入前诊断  单卵裂球 
描述:目的 :建立一种高效、快速、可靠的植入前诊断的性别鉴定方法。方法 :取成人外周血单个淋巴细胞和人胚胎单卵裂球 ,采用多重荧光PCR和多重巢式PCR同时扩增性别识别位点Amelogenin和 5号染色体上的基因IL 3。结果 :男性单个淋巴细胞荧光PCR扩增效率为 72 % ,巢式PCR扩增效率为 6
皮肤成纤维细胞体外培养的安全性实验研究
作者:陈勇 陈玉祥 龙志高 赵迪诚 潘乾 戴和平 夏昆 夏家辉  来源:中国医师杂志 年份:2002 期刊类型 :期刊 关键词: 基因治疗  成纤维细胞  靶细胞  皮肤  体外培养 
描述:目的对所建立的人皮肤成纤维细胞系进行安全性检测 .方法对人皮肤成纤维细胞进行形态学观察、染色体核型分析、软琼脂试验、裸鼠致瘤试验、内毒素试验、支原体检测、病毒因子检测、细菌、真菌检测、异常毒性试验.结果结果均为阴性 .结论所获取的皮肤成纤维细胞可作为一种安全、可靠的靶细胞用于基因治疗研究.
伴有脑干听觉诱发电位异常的腓骨肌萎缩症发现连接蛋白32基因新突变
作者:罗巍 唐北沙 赵国华 夏昆 羊毅 萧剑锋 严新翔 杨期东 夏家辉  来源:中华医学遗传学杂志 年份:2002 期刊类型 :期刊 关键词: 连接蛋白32基因  腓骨肌萎缩症  脑干听觉诱发电位 
描述:目的 报告一个脑干听觉诱发电位有异常改变的腓骨肌萎缩症 (Charcot- Marie- Tooth dis-ease,CMT)家系 ,并探讨与连接蛋白 32 (connexin32 ,Cx32 )基因突变的关系。方法 对整个家系进行临床检查 ,对先证者进行肌电图及脑干听觉诱发电位检查 ,并应用聚合
人Endostatin cDNA的克隆及其在HT1080细胞中的表达
作者:卿志荣 唐爱发 蒋冬贵 郑多 夏昆 李宜雄 陈主初 夏家辉  来源:湖南医科大学学报 年份:2002 期刊类型 :期刊 关键词: HT1080细胞  血管形成抑制因子  Endostatin 
描述:目的 :构建能表达人Endostatin的真核表达质粒。方法 :设计引物从成人肝cDNA文库中通过PCR扩增到EndostatincDNA ,并在 5′端融合编码人胰岛素信号肽序列 ,经测序证实后连接到真核表达载体pcDNA3.1(- )中。将携带基因的真核表达载体质粒pcDNA3.1(- ) S
结肠腺瘤性息肉病蛋白通过与SMAP/KAP3 相互作用与微管结合
作者:王成 郑多 钟向阳 夏昆 黄亮群 戴和平 陈玉祥 夏家辉  来源:生物化学与生物物理进展 年份:2002 期刊类型 :期刊 关键词: 相互作用  SMAP/KAP3  结肠腺瘤性息肉病基因(APC)  酵母双杂交  微管 
描述:结肠腺瘤性息肉病基因(adenomatous polytosis coli,APC)的突变导致家族性结肠息肉腺瘤病和散发性结肠癌,APC基因编码一个具有多个结构域、多种磷酸化状态的大分子蛋白质.APC蛋白可通过C段直接或间接与微管结合,同时还可以通过中段与微管结合,但其结合的机制目前还不清楚.为进一