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P11融合蛋白表达、纯化及抗血清的制备
作者:谭志平 黄亮群 郑多 房海燕 夏昆 夏家辉  来源:湖南医科大学学报 年份:2002 期刊类型 :期刊 关键词: p11(CalpactinI  lightchain)  亲和层析  融合蛋白  GST  抗血清 
描述:目的 :表达GST p11和 6xHis p11融合蛋白并制备GST p11特异性抗体。方法 :将人p11基因克隆入两种原核表达载体pGEX 4T 2和pQE30 ,分别在大肠杆菌BL2 1和M15中表达 ,用GlutathioneSepharose 4B和Ni NTAagar ose亲和柱分别纯化
TPA基因克隆与体外表达模型建立
作者:周新民 杨进福 陈勇 赵迪成 夏昆 胡冬煦 夏家辉  来源:中国医师杂志 年份:2003 期刊类型 :期刊 关键词: CHO细胞  缺血性心脏病  组织型纤溶酶原激活因子 
描述:目的重组TPA基因并构建体外表达模型,为缺血性心脏疾病的基因治疗及防止血管再狭窄奠定基础.方法构建真核表达载体pcDNA3.1(+)TPA,然后将pcDNA3.1(+)TPA转入中国苍鼠卵巢(CHO)细胞,并观察外源性TPA表达情况.结果真核表达载体pcDNA3.1(+)TPA在CHO细胞表达量好,
细胞裂解法对植入前诊断中聚合酶链反应扩增效率的影响
作者:李崎 马燕琳 潘乾 夏家辉 戴和平 夏昆  来源:湖南医科大学学报 年份:2002 期刊类型 :期刊 关键词: 单细胞  植入前诊断  聚合酶链反应 
描述:目的 :探讨优化细胞裂解条件 ,提高植入前诊断中聚合酶链反应的扩增效率。方法 :吸取单个淋巴细胞或人胚胎单卵裂球 ,用碱裂解液、蛋白酶K裂解液和改良的蛋白酶K裂解液进行处理 ,随后以巢式 -聚合酶链反应扩增人肾上腺脑白质营养不良基因 (ALD基因 )的 3号外显子 ,比较其扩增效率。结果 :三种裂解
Cx31相互作用蛋白:p11在酵母中表达可能存在翻译移码
作者:黄亮群 施小六 谭志平 房海燕 郑多 夏家辉 夏昆  来源:生物化学与生物物理学报 年份:2002 期刊类型 :期刊 关键词: 依钙结合蛋白I  轻链  体外结合  移码  间隙连接蛋白31  酵母双杂交 
描述:間隙連接蛋白31(connexin31, Cx31)是間隙連接蛋白(connexin)家族中的一員,關于Cx31的功能及其調節知之甚少。Cx31胞內羧基端包含幾個可能的磷酸化位點。爲對其功能有所瞭解,利用酵母雙雜交技術,篩選與Cx31梭基端(206~270位密碼子之間)相互作用的蛋白質,分離到了p1
一种简便快速构建基因突变体的有效方法
作者:张铭湘 文剑 夏昆 郑多 张灼华 夏家辉  来源:中华医学遗传学杂志 年份:2002 期刊类型 :期刊 关键词: 定点诱导突变  基因  聚合酶链反应 
描述:目的 介绍一种简便、快速、准确构建定点诱导突变体的新技术。方法 设计 3条引物 ,一条突变引物 ,另外两条引物位于突变引物的两侧 ,并带上合适的酶切位点 ,以供突变片段构建完成以后可以克隆进入合适载体。然后以突变引物与其附近的反向引物一起扩增带突变位点的片段 ,再以此 PCR产物片段为引物与剩下的另
人神经元钾离子通道 α 亚基基因的分子克隆
作者:夏昆 何云贵 郑多 张华莉 潘乾 夏家辉  来源:科学通报 年份:2001 期刊类型 :期刊 关键词: 克隆  突变检测  痉挛性截瘫  人神经元钾离子通道α亚基基因 
描述:为克隆新的钾子通道基因并研究其与疾病的关系,将大鼠的神经元钾离子通道α亚基编码区序列在人的EST数据库进行BLAST分析,得到一个与其有87%的一致性的EST,通过重叠群的构建和5′-RACE反应,克隆了人神经元钾离子通道α亚基(homo sapiens neuronal potassium cha
人神经元钾离子通道 a 亚基基因的分子克隆
作者:夏昆 何云贵 郑多 张华莉 潘乾 夏家辉  来源:科学通报 年份:2001 期刊类型 :期刊 关键词: 人神经元钾离子通道a亚基基因(HNKA)痉挛性截瘫突变检测 
描述:为克隆新的钾离子通道基因并研究其与疾病的关系, 将大鼠的神经元钾离子通道a亚基编码区序列在人的EST数据库进行BLAST分析, 得到一个与其有87%的一致性的EST, 通过重叠群的构建和5′-RACE反应, 克隆了人神经元钾离子通道a亚基(homo sapiens neuronal potassiu
STK11基因突变在中国人Peutz-Jeghers综合征中的特征
作者:李宜雄 吕新生 夏家辉 汤熙翔 夏昆 何云贵 张桂英  来源:中华医学遗传学杂志 年份:2001 期刊类型 :期刊 关键词: Peutz  DNA测序  Jeghers综合征  基因突变  STK11基因 
描述:目的 明确STK11基因在中国人Peutz-Jeghers(PJ)综合征的突变特征,为建立基因诊断奠定基础。方法 用DNA直接测序方法,对18个家系的PJ综合征患者STK11基因9个外显子进行研究。结果 在6个家系中发现6个使基因产物发生改变的突变,推测最终导致产生截短型蛋白。结论 在中国人PJ综合
用酵母双杂交技术筛选与APC相互作用的蛋白及其cDNA克隆
作者:钟向阳 张灼华 施小六 夏昆 禹宽平 夏家辉  来源:云南大学学报(自然科学版) 年份:1999 期刊类型 :期刊 关键词: 医学遗传学  湖南医科大学  神经生物学功能  cDNA克隆  白及  国家重点实验室  酵母双杂交技术  中枢神经系统  蛋白质相互作用  腺瘤息肉病 
描述:用酵母双杂交技术筛选与APC相互作用的蛋白及其cDNA克隆
类间隙连接蛋白β-3基因结构及其编码区序列变异的研究
作者:夏家辉 夏昆 何云贵 禹宽平 戴和平 汤熙翔 潘乾  来源:云南大学学报(自然科学版) 年份:1999 期刊类型 :期刊 关键词: 医学遗传学  湖南医科大学  编码区  基因结构  国家重点实验室  结构域  序列变异  基因频率  错义突变  间隙连接蛋白 
描述:类间隙连接蛋白β-3基因结构及其编码区序列变异的研究